基因型限制和转化周期长是棉花遗传转化面临的主要屏障,阻碍了基因功能验证和优异转基因材料创制。因基因型限制严重,往往难以实现以主栽品种为基础受体的基因聚合和品种改良。
近日,郑州大学农学院李付广研究员团队建立了跨越种间/种内、无基因型限制的棉花高效遗传转化体系(shoot apical meristem cell-mediated transformation,SAMT),破解了以当前主栽品种为受体难以进行遗传转化的“卡脖子”难题,为加速棉花基因工程育种进程提供了技术保障。相关研究结果以“Efficient genotype-independent cotton genetic transformation and genome editing”为题在线发表在植物学综合性期刊《植物学报(英文版) (Journal of Integrative Plant Biology)》。
该研究以棉花种子顶端分生组织干细胞为外植体,结合农杆菌和超声波处理将外源载体整合到干细胞中,进而诱导干细胞产生不定芽。利用壮观霉素抑制主芽生长,诱导腋芽的产生,有效降低嵌合体概率。建立的SAMT转化体系成功打破棉花种间和种内遗传转化的基因型限制,陆地棉、海岛棉和亚洲棉等多个棉种均成功进行了转化,获得的过量表达转基因材料和基因编辑突变体材料均可稳定遗传。SAMT体系的转化周期为2-3个月,未发生转基因再生苗不育现象,也未出现畸形苗。
中棉所李付广研究员为该论文的通讯作者,葛晓阳博士、杨召恩博士、许洁婷博士和杨晓凤博士为论文共同第一作者,王晔博士、陈艳丽博士等参与研究工作。
原文链接:https://doi.org/10.1111/jipb.13427
无基因型限制的棉花高效遗传转化体系